Тестови имуногеностису од суштинског значаја за развој клиничких лекова, посебно за биотерапеутске производе. Упркос регулаторном фокусу на клиничке захтеве, предклиничка процена имуногености остаје критична у одређеним околностима. Према ИЦХ С6, неклиничку имуногеност треба проценити када постоји значајна промена фармакодинамичке активности или када се изложеност леку промени без фармакодинамичких маркера или индикатора -посредованог имунолошког одговора.
Минимални стратешки консензус Европског форума за биоанализу (ЕБФ)
ЕБФ је основао радну групу 2016. године, што је резултирало консензусом о минималним стратегијама за неклиничку процену имуногености. Кључни параметри укључују СЦП евалуацију, осетљивост, толеранцију на лекове и прецизност:
1. Искључене-вредности:За прагове скрининга препоручује се стопа лажно позитивних резултата (ФПР) од 0,1-1% без потврдног тестирања. ФПР од 0,1% помаже у искључивању лажних позитивних резултата у близини СЦП сигнала, ефикасно откривајући релевантне неклиничке имуне одговоре. Придржавајући се 3Р принципа, СЦП се може одредити коришћењем мањег броја појединачних узорака, идеално 15-30, генеришући 60 тачака података (нпр. 30 узорака анализираних два пута или 15 узорака анализираних четири пута). ФПР потврда узорка пре дозирања није потребна због ограничене неклиничке важности.
2. Осетљивост:Осетљивост треба проценити у оквиру једне серије анализе. МРД би идеално требало да буде испод 100, са осетљивошћу испод 1000 нг/мЛ. Према смерницама НМПА 2021, осетљивост би требало да достигне 250-500 нг/мЛ, при чему би осетљивост испод 100 нг/мЛ била пожељнија ако је то могуће. Концентрација ЛПЦ се може подесити близу 2-3 пута веће од СЦП сигнала без опсежне статистичке анализе.
3. Прецизност:Прецизност треба проценити у три серије анализа, од којих свака укључује шест сетова независно припремљених позитивних контрола на три нивоа концентрације (ХПЦ, МПЦ, ЛПЦ) и шест сетова негативних контрола (НЦ).
4. Нивои толеранције на лекове:Толеранцију на лек треба проценити на нивоима ЛПЦ (или 1000 нг/мЛ позитивне контроле), обезбеђујући да метода може да открије АДА на очекиваним нивоима лека у неклиничким студијама.
Опциони параметри валидације укључују селективност, специфичност, титре и стабилност, прилагођене индивидуалним потребама пројекта.
Решавање индустријских изазова
„Минимална стратегија“ се суочава са практичним изазовима имплементације, посебно због дугогодишњег ослањања индустрије на клиничке смернице за неклиничке студије имуногености. На пример, индустрија често оклева да усвоји стратегије попут „скрининга само са ФПР од 0,1-1% без потврдних тестова“. Без обзира на то, дефинисање граничних вредности, осетљивости, толеранције на лекове и прецизности остаје од кључног значаја.
Препоруке за неклиничке тестове имуногености
С обзиром на признати недостатак преводљивости између неклиничких и клиничких података, ЕБФ саветује следеће:
1. Процена-по-случају:Неклиничке процене анти-антитела на лекове (АДА) треба да буду засноване на научном образложењу и корисности података, а не као подразумевани захтев.
2. Фармакокинетичке/фармакодинамичке (ПК/ПД) студије:Ове студије, спроведене пре ГЛП токсикологије, могу пружити увид у имуне одговоре, али имају ограничену вредност.
3. Токсиколошке студије:Примарни циљ је демонстрирати довољну изложеност и проценити настале патологије и њихову реверзибилност, дефинишући нивое без ефекта и безбедносне границе за клиничку употребу. АДА може, али не мора да утиче на ТК/ПД или да изазове уочене патологије.
4. Доношење одлука:Вероватноћа генерисања имунолошког одговора ин виво треба да води развојне активности анализе, балансирајући пословне ризике и рокове спонзора.
Приступи стратегије имуногености:
- Банкарски узорци и развој/потврђивање тестова само ако се примећују ТК/ПД и утицаји на безбедност.
- Развијте тестове и започните валидацију/тестирање на основу уочених утицаја на ТК/ПД и безбедност.
- Проактивно развијајте и валидирајте тестове на основу пословних ризика и ресурса.
За валидацију теста може се применити скроман приступ, избегавајући пуне захтеве клиничких тестова и применом 3Р принципа. Тестови скрининга са строгим тачкама пресека (0,1-1% ФПР) или приступи сигнал/шум могу бити довољни за анализу узорка.
Усвајањем ових оптимизованих стратегија, предклиничка евалуација имуногености може постати ефикаснија и усклађена са научним и регулаторним очекивањима, што на крају подстиче развој биотерапеутских производа.
